从微生物分类到革兰氏染色

                                                           原创  石决明

 引子：本篇作为微生物基础与现代技术的篇，本着实用性接地气的原则，准备少说学术，希望多聊应用。

   微生物，本来的意思就是微小的生物（必须通过显微镜才能看到），不过后来又有蘑菇，甚至肉眼可见可以活动的黏菌等等，就有点说不清了。

   说到分类，因为角度不同也会有不同的学说，其中出名就是下图，基本上指出了微生物的范围。其中细菌作为研究的为清楚的一部分而存在。

   革兰氏染色是细菌分类中应用广的，江湖地位一直存在。革兰氏染色正确是生化鉴定仪选择鉴定板的步。革兰氏染色正确是飞行质谱选择基质的步。染色如果做得不好，后续工作就可能白做。

   革兰氏染色是一个技术活，在学校当年实验室考核的时候，考的就是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的混合染色，要求区分清楚。现在回想起来，老师出题其实不算难。因为，革兰氏染色存在不少坑。

1.革兰氏染色染色的对象是细胞壁。菌龄很重要，太嫩的细胞壁还没有形成，太老的有可能又自融了。一般要求生长对数期的细菌，通俗的说就是过夜培养的就行。

2.非选择性平板上的单菌落。革兰氏染色染色的对象是细胞壁（又说了一遍，这个重点），如果抑制性平板上的抑制剂刚好抑制的是细胞壁的话，结果那就可想而知了。

3.涂菌要薄，太厚了染不进去，染进去了脱色又脱不干净。

4.染色结果要结合形态来判断。你见过有芽孢的革兰氏阴性杆菌吗？看下图，亮点在圈圈中。

微生物一直是手工操作比较多的操作，非标准化程度比较高，很多步骤都需要经过一些判断后才能进行下一步。市面上早就已经有了全自动的革兰氏染色仪。好处是全自动染色，涂片还是靠自己。染料是通过喷头喷出，比较均匀。各家的染料也在基础染料中添加了某些成分，可以提高染色的效率或者颜色分辨的效果。如果你每天面对大量的未知菌要染色，这个机器还是不错的。如果染色频次比较低，还是自己染色算了。

以一段与医院检验科的医师的对话结束话题。